該模型通過埋植雌激素，進(jìn)而建立了皮膚型狼瘡動(dòng)物模型，主要是檢測(cè)其dsDNA，腎臟變化，結(jié)合皮膚癥狀變化，來確定狼瘡皮膚病模型的建立。目前國際上尚欠缺類似模型，創(chuàng)新點(diǎn)在于該模型可快速建立模型，屬于誘導(dǎo)性狼瘡皮膚病模型，為研究狼瘡皮膚病發(fā)病機(jī)制提供了工具。目前國際無報(bào)道。

無安全性問題。

1.Bmp5短耳（se）小鼠外耳表型

Bmp5純合型短耳小鼠發(fā)現(xiàn)耳廓結(jié)構(gòu)都非常短小，發(fā)育明顯較其正常同胞小，失去正常小鼠耳廓亞結(jié)構(gòu)形態(tài)，小鼠外耳發(fā)育的差異在2周齡時(shí)隨著發(fā)育更加明顯。

2. Bmp5短耳（se）小鼠骨骼阿利新藍(lán)染色方法

選取發(fā)育到40d的短耳小鼠和正常小鼠各3只剝皮處理，放入75%乙醇固定2周，然后放入阿利新藍(lán)工作液中進(jìn)行軟骨染色2 d（根據(jù)樣品大小調(diào)整染色時(shí)間），再放入茜素紅工作液中染色1d，放入1.5%雙氧水溶液中進(jìn)行漂白（肉眼可見色素去除為標(biāo)準(zhǔn)），脫色后依次放入20%、40%、60%、80%的甘油進(jìn)行梯度透明各2周，最后放入100％純甘油中進(jìn)行保存。

A:小鼠全身骨骼染色，左側(cè)為畸形小鼠，右側(cè)為同胞正常小鼠； B: 局部胸廓及肋骨染色，左為畸形小鼠，右為同胞正常小鼠

可見Bmp5短耳（se）純合型突變畸形小鼠的體形較正常野生型較小，特別是胸骨和肋骨的發(fā)育可見明顯的異常，Bmp5短耳（se）純合型突變畸形小鼠胸骨劍突較正常短小，發(fā)育不良，肋骨較細(xì)短，胸廓整體發(fā)育較正常差，小鼠尾骨發(fā)育也較細(xì)短。

Bmp5短耳小鼠動(dòng)物模型(B6.Cg-Bmp5se)

1. Bmp5短耳小鼠繁殖

用同窩的雄性和雌性交配獲得雜合小鼠，得到后代沒有產(chǎn)生突變的小鼠，這些小鼠也未發(fā)現(xiàn)外耳短小畸形，將雜合小鼠互相再雜交，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要陸續(xù)獲得Bmp5短耳小鼠孕鼠，這些孕鼠可以檢測(cè)出純合型、雜合型和野生型胎鼠。該純合型小鼠是可以生育的，但是純合型相互交配會(huì)得到只有純合型的后代，最好的繁殖策略還是雜合小鼠互相雜交。

2. Bmp5短耳小鼠的基因點(diǎn)突變檢測(cè)

DNA測(cè)序：設(shè)計(jì)引物進(jìn)行Sanger法測(cè)序，應(yīng)用試劑盒法裂解鼠尾提取DNA洗脫出的DNA于-20℃保存。通過引物3在線平臺(tái)(http://primer3.ut.ee/)設(shè)計(jì)候選變異引物，引物序列如下：Bmp5正向引物為GGAGGCATTACAAAGAGTTTCG，反向引物為GAACCATTTCACCAGCTCCT。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)反應(yīng)體系：金牌Mix(green)27μl，正向引物1μl，反向引物1μl，模板DNA 1μl，擴(kuò)增產(chǎn)物由擎科生物技術(shù)有限公司進(jìn)行測(cè)序。

Bmp5短耳小鼠野生型（上）、雜合型（中）和純合型（下）的測(cè)序峰圖，Bmp5點(diǎn)突變位置在外顯子2倒數(shù)第7個(gè)堿基，堿基由C突變?yōu)門。

小耳畸形的病因目前還不完全明確，環(huán)境和遺傳因素是目前小耳畸形病因研究的重點(diǎn)。先天性小耳畸形在基因突變致病性研究方面還沒有闡明小耳畸形胚胎發(fā)育的機(jī)制。小耳畸形主要涉及胚胎發(fā)育期間第一和第二鰓弓的異常，主要表型涉及外耳發(fā)育異常。外耳的耳廓是由第一和第二鰓弓的逐漸融合形成的，在發(fā)育過程中第一和第二鰓弓之間是相互作用，兩弓之間的凹槽加深，形成外耳道，從胚胎的起源來分析，外耳的發(fā)育至少在一定程度上是由第一和第二鰓弓通過后腦的部分區(qū)域來介導(dǎo)的，后腦是鰓弓的神經(jīng)嵴細(xì)胞的來源，在后腦的第四段基因突變可以導(dǎo)致外耳的發(fā)育缺陷。

小耳畸形主要是指外耳的先天發(fā)育性結(jié)構(gòu)異常，其嚴(yán)重程度主要表現(xiàn)為從輕度結(jié)構(gòu)異常到完全性耳廓缺失，并且可伴有外耳道狹窄和外耳道閉鎖等一系列先天性外耳異常，輕者耳廓略小于正常， 畸形嚴(yán)重者耳廓全部消失， 絕大多數(shù)患者僅遺留花生狀或貝殼狀的殘耳組織。同時(shí)一些小耳畸形患者也常合并顱面部畸形，中耳及半側(cè)顏面骨及軟組織發(fā)育不良等。

Bmp5短耳小鼠基因突變屬于自發(fā)性突變，也可以說是自發(fā)性點(diǎn)突變，位于第9號(hào)染色體，Bmp5點(diǎn)突變位置在外顯子2倒數(shù)第7個(gè)堿基，堿基由C突變?yōu)門，在氨基酸208處產(chǎn)生一個(gè)終止密碼子，終止密碼子的產(chǎn)生使肽鏈的正常合成發(fā)生終止，該突變的產(chǎn)生可能會(huì)影響B(tài)mp5 蛋白質(zhì)功能，進(jìn)一步影響蛋白網(wǎng)絡(luò)信號(hào)的傳導(dǎo)。